摘要　近年来，许多养鸡场尽管在1日龄雏鸡进行了鸡马立克氏病（MD）的免疫接种，但MD仍然时有发生，并出现一些新特点。本文对MD免疫失败的原因及影响免疫效果的因素进行了分析，指出防制鸡MD的主要措施。关键词　鸡马立克氏病；免疫失败；防制对策鸡马立克氏病（MD）是由疱疹病毒引起的一种具有高度接触性和传染性的肿瘤性疾病，目前在世界上普遍流行，是我国三大重点控制的疫病之一。受害鸡群发病率一般在25%~80%不等，死亡率10%以上，严重时甚至全群覆灭。自70年代Witter研制的火鸡疱疹病毒疫苗(HVT)广泛使用以来,该病得到了有效的控制。但近几年来，尽管年年进行MD预防注射，发病率却显著回升，死亡率8％~30%[1]，并出现一些新特点，再度成为危害养鸡生产最严重的传染病之一,给养鸡业造成了巨大的经济损失。　1 　MD流行新特点                                1.1  主要在集约化养鸡场流行。                       1.2  发病率高  据资料统计，MD 目前是除大肠杆菌病以外的第二大疾病[2]。            1.3   发病日龄范围扩大  MD一般多发生在2~5月龄育成鸡。有报道在20日龄雏鸡就发现MD [3]，最迟可持续到40日龄[4]。1.4   病鸡症状不典型，病理变化出现新的特点，免疫失败的鸡患病症状70%以上不典型[3]，神经型呈劈叉姿势较少，内脏型较多，而内脏型腺胃病变呈上升趋势，据调查，腺胃有MD病变占发病数的40%以上[5]，但都可引起病鸡消瘦和瘫痪，也有内脏型和神经型并发者，而皮肤型和眼型较少见。2　MD免疫失败的原因及影响免疫效果的因素                2.1  MDV 早期感染    鸡的日龄越小，对MDV敏感性越高。据测定，1日龄雏鸡对MDV的易感性比成年鸡高1000~10000倍。MD 疫苗的诱导期一般为10~14天（CVI 988为5天），如果雏鸡在出壳后使用疫苗前成免疫作用未充分建立之前已感染MDV，免疫效果就显著下降。据报道，注射MD疫苗后的雏鸡，在1~2日龄感染MDV，其保护率为20%，7天感染保护率为70%，14天感染保护率为80%[6]。   2.2  母源抗体的干扰    由于MD 疫苗的广泛使用，雏鸡往往带有一定水平的母源抗体。因母源抗体水平较低，不足以对雏 鸡起保护作用，相反会中和疫苗病毒，减少起免疫作用的疫苗病毒数量，从而降低疫苗的免疫效果。试验表明，如果注苗HVT雏鸡有同源母源抗体存在，同时又受到vvMDV感染，则HVT的预防效力由69%下降到10~18%，几乎使HVT苗免疫完全失败[6]。2.3   MDV流行毒株的毒力逐渐增强   在对鸡群免疫的选择性压力下，鸡群流行的MDV毒力逐渐增强。现已证实，许多国家存在vvMDV，一些国家甚至分离出vv+MDV，在我国已有vvMDV存在的报道[1]，感染MDV毒力越强，MD疫苗保护效力就越低。Witter经实验证实，HVT-Fc126对vvMDV毒株md5攻击的保护率很低[7]。 2.4   疫苗问题                              2.4.1   目前应用的各种MD疫苗对接种鸡的保护率不能达到100%，仅有80%~90%，并且疫苗免疫只是提高机体对强毒的抵抗力，而不能阻止强毒继续感染和传播。因此鸡群免疫后，不可避免地仍有少部分鸡发病。2.4.2  我国现有疫苗PFU达不到免疫要求，现在国外为4000-6000PFU（每只鸡0.2ml），国内的1500PFU显然不够。      2.4.3  选择疫苗不适合当地情况，如当地鸡场流行的是vvMDV，选择HVT冻干苗免疫就会失败。        2.5  疫苗贮存、运输和使用不科学                         2.5.1   按规定，冻干疫苗在2~8℃条件下贮存和运输，细胞结合性疫苗在液氮罐中（-196℃）贮存和运输。冻干苗保存时间过期（超过6个月）或经常停电使疫苗反复冻溶，液氮苗不及时补充液氮，疫苗在液氮面之上，都可使疫苗免疫效力减弱或失效。            2.5.2  疫苗稀释后不立即使用或不现配现用，不在规定时间内用完，导致疫苗PFU下降。据报道[8]，国产HVT疫苗稀释1小时后，其PFU由原来的1500个降至700余个，2小时后降至450个，由于PFU不足，必然会降低疫苗的保护率。          2.5.3  MD疫苗与其他疫苗配合接种或与抗菌药物、维生素等混合注射，将疫苗专用稀释液的酸碱度或渗透压改变，致使疫苗的病毒活力降低，影响免疫效果。                        2.5.4  由于稀释倍数错误、注射过快等引起注射剂量不足或打空气针、漏针。               2.6  免疫抑制性疾病   一些病毒如传染性法氏囊病病毒(IBDV)、网状内皮增生病病毒（REV）、鸡传染性贫血因 子（CAV）、鸡白血病病毒（ALV）等引起的传染病和鸡白痢疾病等，感染鸡群后可抑制机体的体液免疫和细胞免疫[6,9]，从而降低MD疫苗的免疫效果。            2.7  应激反应   断喙、转群、饥渴、高温、寒冷、密度过大等各种应激因素均可抑制机体免疫应答，导致免疫力下降。所以在饲养管理过程中出现的应激因素越多，患MD的可能性越大。           2.8  鸡的遗传易感性  不同品种、品系的具有不同遗传背景的鸡对MDV的易感性有很大的差异，如三黄鸡对MD较易感，而白羽来航鸡对MD抵抗力较强。   3 　防制对策                               3.1  搞好环境卫生隔离，避免早期感染                   3.1.1　鸡场、鸡舍布局设计要考虑MD早期感染的控制问题。加强孵化室离鸡舍至少500米以上，并处于上风位置，育雏舍要尽量远离成鸡舍。                                  3.1.2   孵化器和出雏器要严格消毒， 种蛋经彻底消毒方可入孵，并要搞好孵化室的卫生工作，以防止含有病原的杂物污染蛋壳，从而污染雏鸡。                                    3.1.3   雏鸡在30日龄前要进行隔离饲养，特别是1~15日龄，饲养环境必须严格消毒除尘。使雏鸡不能接触MDV,避免发生早期感染。每周进行带鸡消毒两次，进出人员要消毒，地面应保持湿润一些，防止起尘。3.1.4   提倡商品肉鸡进行MD免疫 ，减少环境污染。 因肉鸡饲养场是MDV的易感地，也是MDV的疫源扩散地，对周围养鸡场感染MDV会带来严重威胁。                          3.2   正确选择疫苗                              3.2.1   选用正规厂家生产的质量稳定的疫苗，疫苗具有足够的PFU，病毒含量不少于2000PFU。特别注意疫苗要保存完好，封口要严，且在有效期内。                            3.2.2   对于无MD病史且无vvMDV的鸡场，一般增大剂量使用HVT冻干苗免疫即可。     3.2.3   对免疫失败，MD污染严重的地区可采用细胞结合性苗或双价苗、多价苗。实验证明，多价苗抗原间协同保护作用可抗vvMDV，且产生免疫力早，预防效果好。广西兽医研究所研制的814（Ι型自然弱毒株）+HVT（Ⅲ型）二价苗在广西九个鸡场免疫30万只鸡，重点观察了12万只鸡，用HVT苗后发病率为35.35%，用二价苗后发病率仅为0.7%[6]。                3.3  有效使用疫苗                               3.3.1   注射器和针头要经高压灭菌或煮沸消毒，不能使用消毒药物消毒，以免疫苗受到破坏。        3.3.2   疫苗稀释要用专用稀释液，且稀释液中不能再混入其它药物或疫苗。疫苗现配现用，稀释后放在盛有冰块的容器中，力争在0.5~1小时内用完，超过2小时不能再用。        3.3.3  免疫接种时应选择颈部靠下处皮下或大腿外侧肌肉内注射。注射时要勤换针头，并及时校对注射器，以免注苗量不足或空注。3.3.4    HVT冻干苗加免疫促进剂―ACM1（苏威公司生产），可提高免疫效果。据报道[10]，HVT冻干苗+ACM1的免疫效果与HVT-SB1双价苗相当。湖南某鸡场单用HVT冻干苗免疫鸡群发病率在7%以上，改用HVT+ACM1免疫发病率降至0.06%，很好的控制了MD。      3.4   避免母源抗体的干扰                            3.4.1  改进免疫程序，把过去的“常规剂量，一次免疫”改为“倍量注射，二次免疫”。即雏鸡出壳后24小时内注射1.5~2倍剂量的疫苗，以补偿因母源抗体中和作用所消耗的疫苗量，12~21日龄再进行第二次免疫，以激发第一次免疫已致敏的免疫细胞更强烈的免疫应答。实践证明，进行二次免疫接种保护率可提高13.8%[1]，显著高于一次免疫鸡群。               3.4.2  世代交替免疫接种，不同世代鸡交替使用不同血清型的疫苗。因一种血清型的疫苗产生的母源抗体对另一种血清型的疫苗无明显干扰作用，因此父代和子代鸡使用不同血清型的疫苗可避免母源抗体的干扰。3.4.3  使用细胞结合的HVT苗、二价苗或三价苗    细胞结合MD疫苗，苗毒包藏在细胞内，不易被母源抗体中和。据资料介绍，100PFU的细胞结合HVT苗与300~1000PFU的HVT冻干苗免疫效果相当。        3.4.4  鸡胚免疫　1982年shatma等证实胚胎MD免疫力比出壳后免疫效果好，且可以避免母源抗体的干扰[1]。有条件的鸡场可采用18日龄鸡胚免疫法。                               3.5   加强饲养管理， 减少应激因素，做好疾病预防工作         3.5.1  按育雏要求保持适宜温度、湿度和空气新鲜，饲养密度要合理。                 3.5.2  供给雏鸡全价饲料，在饲料和饮水中适当添加多种维生素和抗菌药物，提高机体抵抗力。   3.5.3  做好白痢病、球虫、IBD、ND、大肠杆菌等病的预防工作，按免疫程序及时接种，增强雏鸡对各种疾病的抵抗能力。     3.6  选育抗MDV的鸡群   采用抗病育种的途径培育抗MDV鸡群是今后控制MD的主要途径之一。如俄罗斯经过20年的遗传选择，于1996年育成抗MD蛋鸡新品种――俄罗斯雪白鸡[11]，对MDV具有较强的抵抗力。3.7  鸡群中发现疑似MD病鸡应立即剔出隔离，确诊后扑杀深埋，并增加带鸡消毒的次数，由每周一次改为隔日一次。对未出现症状的鸡采用大剂量MD疫苗（6~8倍）进行紧急接种，以干扰病毒传播，使未感染鸡产生免疫抗体，抵御MDV强毒侵袭。4  小结    MD目前尚无有效的治疗方法，使用疫苗免疫接种是当前防制MD的主要手段。但MD免疫只能控制MD，不能消灭MD，并且常受许多因素影响免疫效果。为保证免疫成功，必须针对免疫失败的原因及影响因素，正确地使用疫苗和采取综合防制措施才能达到最好效果。